CONTACT US

联系我们

微信:surprise1718

Q Q:2197655602

传真:13017663786

邮箱:biolabworld@163.com

公司地址:郑州高新技术产业开发区迎春街52号

了解细胞培养板如何选择及细胞培养步骤

来源:莱浦生物科技  2019-12-20

人体的细胞是很神奇的存在,每次去医院检查医生都会给我们抽血检查,因为血液里面有大量的细胞。身体出现变态细胞也会发生变化。这些都是通过医学界一遍遍的试验过程发现的。实验中离不开细胞培养板,那么细胞培养板应该如何选择呢?细胞培养的步骤又是怎样的呢?跟着小编来了解一下吧。

细胞培养板.jpg

一、细胞培养板如何选择

1、孔的数量

大多数用户在组织培养瓶上开始组织培养。不过,许多应用也需要多孔板。理想的数量嘛,取决于你所需的通量水平,以及是否有机器人的协助。完全手动地向96孔板中添加试剂,这并非不可行,但有电动移液器或机器人的帮助当然更好。扩展到384孔板,就更加需要机器人,而1536孔板更是绝对需要。

2、孔的形状

孔的底部可以选择平的、圆的,或锥形的,这取决于细胞类型和下游应用。对于传统的2D细胞培养(如HeLa或MDCK细胞),特别是需要对培养物进行成像或分光光度测定,通常首选平底。对于不存在接触抑制的细胞,弧形底也不错。

3、微孔板的颜色

多孔板的颜色也与应用息息相关。如果用相差显微镜或肉眼观察细胞,可选择透明的多孔板。不过,对于可见光光谱以外的应用(如冷光或荧光),有颜色的多孔板(如白色或黑色)则是必需的。在使用从顶部读数的仪器时,底部应该是不透明的,而使用显微镜或底部读数的仪器时,应选择底部透明的多孔板。

4、表面处理

选择哪种细胞表面处理,这要取决于你培养的是悬浮细胞还是贴壁细胞。对于悬浮或球体细胞培养,建议使用BRANDinertGrade>trade。微孔板,它经过专利的疏水凝胶处理,可抑制细胞或蛋白附着。对于轻松附着的贴壁细胞(如HeLa),标准的组织培养表面就足够了。

二、细胞培养步骤

1、剪切组织

先将所取得的组织,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后,用手术刀将组织切成若干小块,移入青霉素小瓶或小烧杯中,加入适量缓冲液,用弯头眼科剪,反复剪切组织,直到组织成糊状,约1mm3大小。

2、消化分离

消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞,以利于进一步的培养,常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。

3、培养

细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为(2~5)×105 cells/ml,或实验所需密度,分装于培养瓶中,使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内,5%CO2,37℃静置培养。


400-1177-202

2197655602